猕猴桃基因组DNA文库的构建

编号 zgly0000325032

文献类型 期刊论文

文献题名 猕猴桃基因组DNA文库的构建

作者 许文平  徐昌杰  陈昆松  张上隆 

作者单位 浙江大学果实分子生理与生物技术实验室/农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室 

母体文献 果树学报 

年卷期 2004,21(3)

页码 204-207

年份 2004 

分类号 S663.4 

关键词 猕猴桃  基因组DNA文库  PCR 

文摘内容 采用改良CTAB法提取美味猕猴桃(Actinidia deliciosa cv.Bruno)基因组DNA, 经CsCl密度梯度离心纯化后用Sau 3AI部分酶切, 通过透析袋电泳的方法分级回收, 剔除14kh以下的片段, 回收长为14～23kh的酶切片段。部分酶切片段经dATP和dGTP部分补平后与Lambda FIX Ⅱ载体连接, 连接产物用GigapackⅢ Packaging Extract进行包装, 最后得到含有1.05×10^6pfu的基因组文库, 扩增后文库滴度为2.5×10^9pfu/mL。利用6对根据植物基因保守区或猕猴桃基因序列设计的专一引物对基因组文库和基因组DNA进行PCR扩增, 均得到与预计长度相符的目的基因片段。