矮牵牛自交不亲和性基因sx的克隆及功能初步分析

编号 zgly0001460096

文献类型 期刊论文

文献题名 矮牵牛自交不亲和性基因sx的克隆及功能初步分析

作者 祝建波  何黎  邱红林  陈泉  闫甜甜  程晨 

作者单位 石河子大学农业生物技术重点实验室 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2013年05期

年份 2013 

分类号 S681.6 

关键词 矮牵牛  SX基因  克隆  功能分析 

文摘内容 利用NCBI、CODEHOPE、Primer Premier5.0等数据库和生物软件设计兼并引物,以矮牵牛花柱cDNA为模板,利用RT-PCR扩增到1条长为417 bp的序列,在GenBank中比对发现,该序列与SX基因相似性最高。然后以SX序列为模板设计特异性引物,RT-PCR扩增到1条全长为747 bp的目的片段,测序结果分析表明,该基因核苷酸序列开放阅读框全长660 bp,编码220个氨基酸,其中包括有22个氨基酸的跨质膜信号肽区,和5个保守区(C1-C5)以及2个高变区(Hva,Hvb),据前人研究所知,该基因具有S-核酸酶功能。同时,从番茄DNA中克隆到一长为717 bp的花粉特异性启动子LAT52。为了使SX基因能在花粉中发挥其S-核酸酶功能,去掉22个氨基酸跨质膜信号肽(命名为sx)之后,与番茄花粉特异性启动子LAT52嵌合构建植物表达载体并转化拟南芥。TTC染色结果表明,LAT52能特异性的在花粉中调控sx基因的表达,使花粉活力很低甚至没有活力,从而使转基因植株不育。