破碎法提取家蚕微孢子虫孢子核酸的PCR检测灵敏度试验

编号 zgly0001399899

文献类型 期刊论文

文献题名 破碎法提取家蚕微孢子虫孢子核酸的PCR检测灵敏度试验

作者 李光才  蔡顺风  何祥康  何欣怡  马焕艳  孟祥坤  邱海洪  何永强  鲁兴萌 

作者单位 浙江大学蚕蜂研究所  浙江出入境检验检疫局技术中心 

母体文献 蚕桑通报 

年卷期 2011年04期

年份 2011 

分类号 S884.2 

关键词 家蚕微粒子病  孢子  聚合酶链式反应  检测  灵敏度 

文摘内容 蚕微粒子病检测技术是该病防治中的一项重要技术,本文在通过破碎法提高模板核酸获取量的基础上,对纯化家蚕微粒子虫孢子的PCR检测灵敏度进行了测试。提取核酸-模板稀释测试12对引物的灵敏度中有4对引物达到0.05粒(102粒/mL)、4对引物5粒(104粒/mL)、1对引物50粒(105粒/mL)、2对引物500粒(106粒/mL)和1对引物5000粒(107粒/mL)。两对灵敏度较高的引物(NbZS004F/NbZS004R和NbZS007F/NbZS007R)灵敏度临界值(0.05粒和0.005粒)的PCR重复检测率均为90%。纯化家蚕微粒子虫孢子稀释后提取核酸再进行PCR检测试验中,NbZS004F/NbZS004R和NbZS007F/NbZS007R的灵敏度分别为:5粒(104粒/mL)和0.5粒(103粒/mL)。