两段杨树叶绿体DNA片段的克隆及叶绿体定点转化载体的构建

编号 zgly0000247010

文献类型 期刊论文

文献题名 两段杨树叶绿体DNA片段的克隆及叶绿体定点转化载体的构建

学科分类 220.99;林学其他学科

作者 周奕华  张中林 

作者单位 中国科学院遗传研究所 

母体文献 高技术通讯 

年卷期 2001,11(9)

页码 6-12

年份 2001 

分类号 S792.11  S722.39 

关键词 杨树  叶绿体定点转化  绿化荧光蛋白基因  苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因  植物基因工程  基因克隆  载体构建  遗传改良 

文摘内容 利用PCR方法, 从毛白杨(Populus tomentosa C.)叶绿体基因组中克隆了1.7kb和1.6kb的相邻DNA片段, 对其进行序列分析表明, 扩增片段分别具有1766个和1601个核苷酸, 前者包括3′rps12, rps7基因的编码区及其边界序列, 后者包含ndhB基因的第一外显子和内含子。本文还构建了杨树这两个片段的限制酶切图谱, 并以这两个相邻片段为同源重组片段, 分别将绿色荧光蛋白(GFP)基因和苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白(Bt)基因, 及其原核表达框插入其间, 构建了杨树叶绿体定点转化载体pPZG和pPZB。这两个特异性载体将定位整合到杨树叶绿体基因组中反向重复区的rps7和ndhB基因的间隔区, 并高效表达GFP和Bt基因。迄今为止, 本文所报道的内容在国内、外尚属首次。