大豆持绿基因GmSGR的RNA干扰载体构建及遗传转化

编号 zgly0001644981

文献类型 期刊论文

文献题名 大豆持绿基因GmSGR的RNA干扰载体构建及遗传转化

作者 刘阳颖  高乐  韩俊  李润枝  康恩宽  韩天富  谢皓  王程 

作者单位 北京农学院植物科学技术学院北京农业应用新技术北京市重点实验室  中国农业科学院作物科学研究所农业部北京大豆生物学重点实验室 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年17期

年份 2018 

分类号 S565.1 

关键词 大豆  持绿基因  基因克隆  RNA干扰载体  遗传转化 

文摘内容 持绿基因(Stay Green gene)在植物衰老过程中起到了重要的作用。本研究利用同源序列PCR方法、Gateway重组技术和子叶节遗传转化方法,对大豆持绿基因Gm SGR进行RNAi载体的构建,并将其转入到大豆受体中,获得转基因阳性植株。结果显示,分别获得长度为786 bp的Gm SGR1 CDS序列,长度为816 bp的Gm SGR2 CDS序列及355 bp的att B-Gm SGRi干扰片段。依据RNAi引物设计原则和Gateway重组技术,将干扰片段依次导入到入门载体p DONR221和表达载体p B7GWIW2(Ⅱ)中,并转化农杆菌EHA105,通过子叶节法将其转入大豆受体中,最终获得阳性转基因植株。本研究在m RNA水平沉默同源靶基因,干扰大豆Gm SGR基因功能,结果显示其叶片和种子有趋向持绿的特性。本研究为探究持绿基因的遗传效应,作用机理提供实践参考,为高光效大豆的遗传改良,探讨植物衰老延缓机制,提高产量和品质等提供理论支持。