强MAR的分离及其体内外功能鉴定

编号 zgly0000282162

文献类型 期刊论文

文献题名 强MAR的分离及其体内外功能鉴定

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 张可伟  王健美 

作者单位 山东农业大学生命科学学院 

母体文献 科学通报 

年卷期 2002,47(20)

页码 1572-1577

年份 2002 

分类号 Q943.2 

关键词 功能鉴定  MAR分离  核基质结合序列  体外结合  β-葡糖醛酸酶  外源基因表达  高效表达载体  植物基因工程 

文摘内容 将MAR(matrix attachment region)构建到外源基因表达盒两侧可以促进外源基因的表达克服基因沉默。用PCR方法从烟草和拟南芥中分离到4个新的MAR序列(TM2, TM3, AM1和AM2), 以水稻悬浮细胞为材料, 提取大量细胞核制备核基质, 以已发表的MAR(TM1)和对照, 对4个新MARs序列进行体外结合实验, 结果表明TM2和TM3与核基质的结合能力强于已知MAR序列。将4个新MARs和对照分别顺向构建和表达载体pBI121 gus基因表达盒两侧, 用农杆菌介导法转化烟草, 获得转基因植株。对转基因植株体内GUS酶活性检测表明, TM1, TM2, TM3和AM1均能命名外源基因表达增强, 其中TM2增强5倍, TM1增强1.5倍, TM2增强效果强于对照TM1。表明分离到一个新的强MAR, 可以用于高效表达载体的构建。对5个MARs的序列特征、体外结合能力及外源基因表达影响三者之间的关系进行了分析, 并对获得的强MAR在植物基因工程中的应用进行了讨论。