A蛋白间接酶联免疫法对杂交竹梢枯病菌蛋白毒素的检测

编号 zgly0000806809

文献类型 期刊论文

文献题名 A蛋白间接酶联免疫法对杂交竹梢枯病菌蛋白毒素的检测

学科分类 220.1510;林木育种学

作者 朱天辉  李姝江  韩珊  谯天敏 

作者单位 四川农业大学林学院 

母体文献 四川林业科技 

年卷期 2012(5)

页码 8-11

年份 2012 

分类号 S763.7 

关键词 酶联免疫法  毒素  杂交竹  暗孢节菱孢菌 

文摘内容 采用A蛋白双抗夹心法,在包被抗血清前先用A蛋白包被微量测定板,利用A蛋白抗血清中免疫球蛋白的FC部位结合,以F(ab＇)2部位吸附抗原毒素,在被吸附的毒素上再加一层相同的抗血清和酶标记的A蛋白,以检测杂交竹梢枯病菌毒素蛋白。结果表明: A蛋白预包被能提高检测效价,降低本底值。抗原浓度对酶联检测有显著影响,纯毒素稀释倍数大于10-6,检测结果与对照接近,不适宜用于检测。OD值随抗原稀释倍数的增加下降,且下降幅度受测定抗血清浓度的影响;当检测液稀释1∶5(1∶50时,测定抗血清浓度在10-4(病株汁液)和10-6(含毒素发酵液)时可测出显著差别。抗血清浓度为10-4下,含毒素发酵液在标记A蛋白浓度为1∶10(1∶640范围内有较好测定结果,而病株汁液在标记A蛋白浓度为1∶10(1∶160才能测出。本研究首次将此技术用于真菌毒素检测中,该方法对杂交竹病株汁液中的致病毒素有高度的特异性和灵敏度,能早期诊断暗孢节菱孢菌引起的杂交竹梢枯病。