源自嗜热菌的α-L-鼠李糖苷酶交联聚集体的制备及应用

编号 zgly0001695772

文献类型 期刊论文

文献题名 源自嗜热菌的α-L-鼠李糖苷酶交联聚集体的制备及应用

作者 许锦  徐佳慧  张小濛  卢昌宁  赵林果 

作者单位 南京林业大学江苏省林业资源高效加工利用协同创新中心  南京林业大学化学工程学院 

母体文献 林业工程学报 

年卷期 2020年02期

年份 2020 

分类号 Q814.2 

关键词 α-L-鼠李糖苷酶  嗜热菌ThermotogapetrophilaDSM13995  PluronicF127  固定化  循环次数 

文摘内容 研究了一种制备嗜热菌Thermotoga petrophila DSM 13995来源的α-L-鼠李糖苷酶交联聚集体的方法。试验结果表明:在酶蛋白与Pluronic F127质量比为1∶8、沉淀剂硫酸铵质量浓度为75 mg/m L、戊二醛浓度为40mmol/L时固定α-L-鼠李糖苷酶,酶活回收率可达49.45%。以硫酸铵-戊二醛(CLEA)的常规顺序制备固定化酶(PAG-R)时,酶活回收率仅为30.87%,而在Pluronic F127-硫酸铵-戊二醛(PL-AS-GL)顺序下制备PAG-R,酶活回收率达到60.90%,固定化剩余酶活力为34 U/m L。此外,研究了固定化酶PAG-R的酶学性质,结果表明PAGR的最适温度为90℃,最适p H为5.0,与游离酶Tpe Rha的酶学性质相近,但在不同温度和p H条件下PAG-R的比酶活更高。PAG-R在90℃保温3 h后剩余酶活力为77.11%,而游离酶Tpe Rha则完全丧失活力,说明固定化酶的温度稳定性得到了较大的提升。以芦丁为底物,比较了PAG-R与Tpe Rha催化芦丁生成异槲皮素的产率差异。在温度80℃、p H 6.5、加酶量4 U/m L、反应时间90 min时,PAG-R能完全转化3 g/L底物,摩尔转化率为100%,产物的生成量是游离酶的2.31倍。连续反应10次后,芦丁相对转化率仍能保持在60%以上,由此可知固定化后的鼠李糖苷酶其催化效率得到了提高,且重复使用性能良好,更有利于工业化应用。