慢病毒介导shRNA抑制Sirt1基因表达对猪前体脂肪细胞凋亡的影响

编号 zgly0001393006

文献类型 期刊论文

文献题名 慢病毒介导shRNA抑制Sirt1基因表达对猪前体脂肪细胞凋亡的影响

作者 杨扬  张朝  庞卫军  杨公社 

作者单位 西北农林科技大学动物科技学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2010年12期

年份 2010 

分类号 S828 

关键词 Sirt1  shRNA  慢病毒  猪前体脂肪细胞  细胞凋亡 

文摘内容 【目的】探讨慢病毒介导的shRNA干扰系统抑制脱乙酰基酶1(Sirtuin type 1,Sirt1)表达对猪前体脂肪细胞凋亡的影响。【方法】构建pLentiH1-Sirt1shRNA慢病毒载体,将其感染猪前体脂肪细胞,运用Hoechst33258染色,于荧光显微镜下观察细胞的形态学变化;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western印迹检测细胞凋亡标志物Cleaved caspase-3的表达情况。【结果】pLentiH1-Sirt1shRNA慢病毒载体可抑制猪前体脂肪细胞中Sirt1的表达,显微镜下可见细胞体积缩小、染色质凝集、核固缩等典型的凋亡特征;流式细胞术显示细胞凋亡率较空载体对照组明显增加,早期和晚期凋亡细胞百分率分别从4%和9%(P<0.05)上升至30%和32%(P<0.05);Western印迹检测显示Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著上调。【结论】慢病毒介导的shRNA可有效地抑制猪前体脂肪细胞中Sirt1的表达,显著促进细胞凋亡,提示Sirt1可能在前体脂肪细胞凋亡中发挥着重要作用。