红花总RNA的快速提取方法

编号 zgly0000577376

文献类型 期刊论文

文献题名 红花总RNA的快速提取方法

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 郭庆华  郭美丽  唐洁 

作者单位 第二军医大学药学院生药学教研室 

母体文献 药学服务与研究 

年卷期 2008,8(3)

页码 190-192

年份 2008 

分类号 Q943 

关键词 红花  RNA  提取法  Trizol法  逆转录聚合酶链反应 

文摘内容 目的：建立从红花组织中快速分离总RNA的方法，为进行反转录PCR(RT—PCR)、快速扩增cDNA末端(RACE)、蛋白质印迹法及其他分子生物学实验奠定基础。方法：采用改良Trizol法提取红花苞叶总RNA时，加入DNaseⅠ消化残留DNA，并加入RNase抑制剂，利用琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度法进行纯度和浓度检测。RT—PCR后，进行cDNA-序列相关扩增多态性(SRAP)分析。结果：抽提的RNA经电泳检测，可见28S、18S、5S RNA三条带，带的亮度强，且28S的宽度是18S的2倍左右。紫外吸光度D260／D280为1．8～2．0，D260／D230为2．0～2．3。总RNA产物进行cDNA-SRAP扩增，出现清晰的条带。结论：改良Trizol法所提取的RNA纯度高，质量好，完整性好，可成功进行cDNA-SRAP扩增。