赤霉素诱导甘蔗GA20-Oxidase基因实时荧光定量PCR分析

编号 zgly0001371353

文献类型 期刊论文

文献题名 赤霉素诱导甘蔗GA20-Oxidase基因实时荧光定量PCR分析

作者 吴建明  李杨瑞  王爱勤  杨柳  杨丽涛  甘崇琨 

作者单位 广西农业科学院经济作物研究所  广西作物遗传改良生物技术重点开发实验室  广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室  中国农业科学院甘蔗研究中心  广西崇左市江州区土肥站 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2009年05期

年份 2009 

分类号 S566.1 

关键词 甘蔗  GA20-氧化酶  赤霉素  定量PCR  基因表达 

文摘内容 本研究以喷清水甘蔗幼茎作为对照(即未处理),经过赤霉素处理后6h、12h、24h和48h的甘蔗幼茎为处理,分别进行取样并提取RNA,反转录获得cDNA作模板,利用SYBR GreenⅠ成功构建了目的基因(GA20-oxidase)和内参基因(GAPDH)的标准品和标准曲线。结果表明:内参基因与目的基因的起始模板浓度与Ct之间呈良好线性关系,决定系数分别为r2=0.998、r2=0.995;溶解曲线均显单峰型,证明扩增的特异性比较好,可对基因表达进行相对定量。定量结果表明:目的基因未处理的表达量最大,赤霉素处理后表达量持续下降,在6h达到最低值,12h后逐渐上升,但到48h又明显下降,且所有处理的表达量均低于未处理,6h、12h、24h和48h比对照的表达量分别下降了24.75%、13.18%、10.23%和20.34%。本实验研究GA20-oxidase基因在赤霉素处理后的表达情况,为进一步克隆甘蔗GA20氧化酶基因全长序列、研究该基因在甘蔗节间伸长过程中的表达调控及甘蔗茎间伸长中的作用机理提供理论依据。