家蚕微孢子虫极管蛋白1(NbPTP1)的基因克隆及原核表达

编号 zgly0001468532

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕微孢子虫极管蛋白1(NbPTP1)的基因克隆及原核表达

作者 吴玉娇  龙梦娴  陈洁  李治  李致宏  潘国庆  李田  周泽扬 

作者单位 家蚕基因组生物学国家重点实验室  西南大学  重庆师范大学生命科学学院 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2014年02期

年份 2014 

分类号 S884 

关键词 家蚕微孢子虫  极管蛋白1  基因克隆  原核表达  免疫印迹分析  间接免疫荧光分析 

文摘内容 极管作为微孢子虫高度特异的结构,在微孢子虫侵染宿主细胞的过程中扮演重要角色。利用家蚕微孢子虫和兔脑炎微孢子虫基因组数据,通过共线性分析获得一个编码家蚕微孢子虫假定极管蛋白的基因NBO7g0016。序列特征分析表明该基因编码富含脯氨酸的409个氨基酸,预测蛋白质分子质量39.6 kD,蛋白质序列的N端具有信号肽,有40个潜在的O-糖基化位点和17个磷酸化位点。以家蚕微孢子虫基因组DNA为模板克隆NBO7g0016基因,并构建插入该基因的重组质粒,转化E.coli BL21（DE3）进行原核表达,融合蛋白经亲和层析纯化后免疫昆明小鼠制备多克隆抗体。免疫印迹实验证明该基因编码的蛋白质在成熟孢子中有表达,间接免疫荧光实验将蛋白质定位于家蚕微孢子虫的极管,确证该蛋白质为家蚕微孢子虫极管蛋白1（NbPTP1,GenBank登录号:EOB15198.1）。初步推测家蚕微孢子虫极管蛋白1具有糖基化修饰特征。