人乳铁蛋白cDNA的克隆及在家蚕细胞中的表达

编号 zgly0001299057

文献类型 期刊论文

文献题名 人乳铁蛋白cDNA的克隆及在家蚕细胞中的表达

作者 刘涛  张耀洲  吴祥甫 

作者单位 浙江大学生物化学研究所  浙江理工大学生物化学研究所  中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所 杭州310029  浙江理工大学生物化学研究所  杭州310018  杭州310018  上海200031 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2005年03期

年份 2005 

分类号 R346 

关键词 人乳铁蛋白cDNA  家蚕细胞  重组杆状病毒 

文摘内容 从人的乳腺组织中克隆了人乳铁蛋白(hLF)cDNA,其DNA序列与GenBank中另外4个hLF cDNA序列具有高度的同源性(同源性达到99%)。将人乳铁蛋白cDNA克隆在质粒pBacPAK8的BamHⅠ位点和XhoⅠ位点,构建成重组转移质粒pBacPAK-hLF。该质粒DNA与已线性化BacPAK6DNA共转染家蚕细胞BmN,在培养的贴壁细胞中挑出空斑,经过3轮纯化,获得重组病毒BmNPV-hLF。蛋白质免疫印迹法检测到在重组病毒感染的家蚕细胞中存在人乳铁蛋白基因的表达产物,分子量约78kD,ELISA法测定结果表明家蚕细胞中重组人乳铁蛋白(rhLF)相对表达量在表达120h达到最高值,约为13.5mg/L。体外生物活性试验表明重组hLF对大肠杆菌JM109具有抑菌活性。