樱花基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

编号 zgly0000502282

文献类型 期刊论文

文献题名 樱花基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

学科分类 220.5010;园林植物学

作者 陈芳  周春玲  韩德铎 

作者单位 莱阳农学院环境艺术学院  聊城大学历史文化学院 

母体文献 江苏农业科学 

年卷期 2007,(2)

页码 85-88

年份 2007 

分类号 S685.99 

关键词 樱花  RAPD  反应体系  优化 

文摘内容 为确保樱花RAPD扩增结果的稳定性和重复性,对Mg^2+、dNTP、引物、模板DNA浓度、Taq酶用量、退火温度,以及PCR循环次数等影响樱花RAPD结果的重要因素进行了初步探索。试验表明,樱花RAPD扩增最适反应体系为20μl反应液中: 1×PCR buffer,2.5 mmol/L MgCl2,0.15 mmol/L dNTP,1 UTaq酶,0.2μmol/L 10bp随机引物,20-30 ng模板DNA。最佳扩增程序为: 94℃预变性4 min,94℃变性30 s,38℃退火30 s,72℃延伸2 min,循环40次,最后72℃延伸10 min,12℃保存。