黄藤ISSR反应体系的条件优化

编号 zgly0000401399

文献类型 期刊论文

文献题名 黄藤ISSR反应体系的条件优化

作者 杨华  宋绪忠  尹光天  白嘉雨  甘四明 

作者单位 浙江省林业科学研究院  中国林业科学研究院热带林业研究所 

母体文献 福建林学院学报 

年卷期 2006,26(2)

页码 152-155

年份 2006 

分类号 Q946.33 

关键词 黄藤  ISSR  优化 

文摘内容 在利用ISSR技术对黄藤进行分子生物学研究过程中, 对影响PCR扩增效果的一些因素, 如模板DNA浓度、Mg^2+浓度、dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度以及退火温度等指标进行筛选和优化, 获得用于黄藤ISSR-PCR分析最适宜的PCR反应条件: 20μLPCR反应体积中含有1×缓冲液, 20ng模板DNA, 2mmol·L^-1MgCl2, 100μmol·L^-1dNTP, 1.5U TaqDNA聚合酶, 0.4μmol·L^-1引物, 2%甲酰胺, 0.5mmol·L^-1亚精胺.扩增程序为: 94℃预变性5min; 再35个循环: 94℃30s, 52℃45s和72℃1.5min; 最后72℃延伸7min.。