编号 zgly0001423482
文献类型 期刊论文
文献题名 新城疫病毒核酸检测标准物质研究
作者 谷强 张伟 高志强 张鹤晓 刘环 蒲静 乔彩霞 张利峰
作者单位 北京出入境检验检疫局
母体文献 中国动物检疫
年卷期 2012年11期
年份 2012
分类号 S855.3
关键词 新城疫病毒 核酸扩增 标准物质
文摘内容 分别设计了3对引物,从灭活新城疫病毒F48E9株和Lasota疫苗株病毒提取的RNA中扩增了完整的M、FA和HN基因编码序列,并克隆于pGEM-T。经测序确认后,采用体外转录方法制备了6种RNA纯品。初步定量后,用RNA保存液稀释至含量约108拷贝数/mL,分装。分装后均一性检测结果显示瓶间差异<5%,稳定性实验表明室温20~25℃(相对湿度20%~50%)14天稳定;长期监测结果表明:2~8℃6个月及-20℃保存1年的含量均无明显变化。委托多家实验室采用外标实时荧光定量RT-PCR检测方法对制备的标准物质进行准确定值。以上结果表明该制备物可以作为新城疫病毒的核酸检测标准物质。