濒危植物巴东木莲ISSR分子标记技术体系的建立

编号 zgly0000576689

文献类型 期刊论文

文献题名 濒危植物巴东木莲ISSR分子标记技术体系的建立

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 李晓玲  温国莉  陈发菊  梁宏伟  何正权 

作者单位 三峡大学生物技术研究中心/天然产物研究与利用湖北省重点实验室 

母体文献 江苏农业科学 

年卷期 2008,(4)

页码 70-73

年份 2008 

分类号 Q943.2 

关键词 巴东木莲  ISSR  分子标记  正交设计  优化 

文摘内容 利用正交设计建立和优化适合于濒危植物巴东木莲的ISSR-PCR分子标记技术体系。对影响ISSR-PCR反应的多个因素，包括引物和DNA模板浓度、Taq酶用量、Mg^2＋和dNTPs浓度以及PCR扩增的退火温度、退火时间及循环次数等进行了优化。结果表明，适于巴东木莲ISSR-PCR反应的分子标记技术体系为：反应总体积20μl，含2μl 10×buffer、1μl 20mmol／L MgCl2、4μl 2μmol／L引物、0．4μl 10mmol／L dNTPs、0．8μl 5U／μl Taq酶及40ng模板DNA；PCR扩增程序为：94℃预变性5min，94℃变性30S，54℃复性45S，72℃延伸1．5min，35个循环，最后72℃延伸7min。本研究建立的ISSR分子标记技术体系稳定性强，重复性高。