柿果实乙醇脱氢酶酶学特性研究

编号 zgly0000773317

文献类型 期刊论文

文献题名 柿果实乙醇脱氢酶酶学特性研究

学科分类 220.45;经济林学

作者 梁银娜  李宝 

作者单位 中国农业大学农学与生物技术学院 

母体文献 中国农业大学学报 

年卷期 2011,16(5)

页码 65-70

年份 2011 

分类号 S665.2 

关键词 柿  乙醇脱氢酶  纯化  最适pH  金属离子 

文摘内容 以磨盘柿(Diospyroskaki Thunb.)果皮为试材, 提取乙醇脱氢酶(Alcohol Dehydrogenase)并进行纯化。经过30%～70%硫酸铵沉淀分离、SephadexG-25脱盐柱脱盐、DEAESepharose Fast Flow离子交换层析纯化后, 研究温度、pH、金属离子、底物对乙醇脱氢酶活性的影响。结果表明, 纯化后乙醇脱氢酶纯化倍数为41.80倍, 活性回收率为44.73%。将乙醇脱氢酶酶液分别置于20、30、40、45、50、55和60℃温育后测定, 其最适反应温度为45℃; 在pH5.0、7.0、8.0、9.0、10.0和11.0下乙醇脱氢酶的最适PH为10.0; 在甲醇、乙醇、丙醇、丁醇和戊醇为反应底物时, 最适底物为丁醇; 金属离子中, K^+0和Na^+对活性略有增强的作用, 二价金属离子除Mg2+几乎没有影响之外, Zn2+、Mn2+和Ca^2+对酶活性有一定的抑制作用, Cu^2+和Fe^3+则完全抑制了酶的活性。在25℃, pH10.0的条件下ADH氧化乙醇的米氏动力学参数Km值为8.33mmol/L, 最大反应速度Vmax为0.021μmol/min。乙醇脱氢酶的活性受温度、pH、金属离子、底物的影响较大, 并且只有在合适的条件下, 酶活性才能达到最大值。