编号 zgly0000817707
文献类型 期刊论文
文献题名 毛白杨4-香豆酸: 辅酶A连接酶(4CL3)的酶学特征研究
作者单位 国家林业局林木埔育重点实验室
母体文献 林业科学研究
年卷期 2013(5)
页码 542-547
年份 2013
分类号 S718.46
关键词 4-香豆酸 辅酶A连接酶 HPLC-MS 原核表达 毛白杨
文摘内容 为了进一步研究杨树4CL基因, 以毛白杨为材料克隆到一个新的毛白杨4CL3基因。生物信息学分析结果显示: 该基因和其他4CL基因一样含有4CL基因家族2个保守框BoxI和BoxII。将4CL3基因连接至原核表达载体pQE30, 表达纯化后测定其蛋白的比活力, 结果显示: 4CL3基因对不同底物表现出了不同的催化效率。对该基因的最适温度和最适pH值测定后发现: 4CL蛋白的最适温度为40℃, 最适pH值为8.5, 且在pH=9.0时有60%的活力。采用HPLC.MS的方法, 分析了4CL3蛋白对混合底物的催化情况, 结果显示: 在混合底物下, 4CL3蛋白对4-香豆酸、阿魏酸和肉桂酸都表现较高的活力, 而对芥子酸和咖啡酸没有活力。