褐飞虱SRAP-PCR体系的优化与确立

编号 zgly0001476185

文献类型 期刊论文

文献题名 褐飞虱SRAP-PCR体系的优化与确立

作者 张磊  荆胜利  何光存  江磊  李刚  刘虹  覃瑞 

作者单位 中南民族大学南方少数民族地区生物资源保护及综合利用工程中心  武汉大学生命科学学院杂交水稻国家重点实验室 

母体文献 植物保护 

年卷期 2014年02期

年份 2014 

分类号 S435.112.3 

关键词 褐飞虱  SRAP-PCR  正交试验  反应体系优化 

文摘内容 采用L16(45)正交试验设计,对褐飞虱SRAP-PCR反应体系中的Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物浓度和DNA模板浓度5个因素进行优化,确立了褐飞虱SRAP-PCR最佳的反应体系。结果表明:褐飞虱SRAP-PCR最佳反应体系为:总体积10μL,Mg2+浓度3mmol/L、dNTPs为150μmol/L、TaqDNA聚合酶2U、正反向引物各0.3μmol/L、DNA用量25ng以及1×PCR Buffer。使用生物型1雌虫与生物型2雄虫单对杂交F2群体对优化后的褐飞虱SRAP-PCR反应体系进行验证,获得了条带清晰、多态性丰富的图谱,并发现共显性条带,表明确定的反应体系稳定可靠。