一种在油茶叶片瞬时表达基因的方法

专利号CN202411821116.1

专利名称一种在油茶叶片瞬时表达基因的方法

发明人 马晓玲 柏芮 袁德义 欧阳翔 龚文芳 陈佳昕

申请人 中南林业科技大学

公开日2025.01.28

年份2025

主分类号 C12N15/82

专利类型发明

国家省市 湖南

代理机构北京知文通达知识产权代理事务所(普通合伙) 16051

内容摘要  本发明属于植物生物技术和基因工程领域，具体涉及一种在油茶叶片瞬时表达基因的方法。其包括以下步骤：1)制备含有目的基因的植物表达载体的农杆菌侵染液，农杆菌侵染液最适OD 600 值为0.6至0.9；2)用一次性无菌注射器针管在非离体的叶龄为6‑12月的油茶成熟叶片背面进行划线造伤，将步骤1)所述的侵染液吸入注射器并抵在伤口处进行注射，直至侵染液从伤口处扩散至全叶；3)随后立即用锡箔纸包裹叶片进行遮光处理24‑36小时；4)于处理后第2‑6天对转基因叶片的目的基因表达情况进行检测。本方法所述的方法通过注射油茶成熟叶片，实现对油茶目的基因的瞬时过表达，可快速、高效地实现在油茶本体进行目的基因功能验证。

主权利要求  1.一种在油茶叶片瞬时表达基因的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)制备含有外源基因的植物表达载体的农杆菌侵染液，农杆菌侵染液的OD 600 值为0.6至0.9；2)用无菌注射器针管在非离体的油茶成熟叶片背面进行划线造伤，将步骤1)所述的侵染液吸入无菌注射器并抵在伤口处进行注射，直至侵染液从伤口处扩散至全叶；3)随后立即用锡箔纸包裹叶片进行遮光处理24-36小时，于处理后的第2-6天对转基因叶片的目的基因表达情况进行检测。

联系地址410004 湖南省长沙市韶山南路498号

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