均匀设计优化兴安落叶松ISSR-PCR反应体系

编号 zgly0001436401

文献类型 期刊论文

文献题名 均匀设计优化兴安落叶松ISSR-PCR反应体系

作者 王洪梅  周志军  李艳霞  王福德  翁海龙  康迎昆  周显昌  李春明  刘洋 

作者单位 黑龙江省林业科学研究所  哈尔滨剑桥三中 

母体文献 林业科技 

年卷期 2013年01期

年份 2013 

分类号 S791.222 

关键词 兴安落叶松  ISSR  均匀设计  优化体系 

文摘内容 采用均匀设计方法,对影响兴安落叶松ISSR-PCR体系的MgCl2、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶和模板5个组分的浓度进行了U16(45)和U12(35)两轮优化,建立了适合于兴安落叶松的ISSR-PCR反应体系。该优化的20μL反应体系包含MgCl23.0 mmol/L、dNTPs 0.15 mmol/L、引物0.5μmol/L、TaqDNA聚合酶1.0U、模板20ng/20μL。并进一步进行梯度退火试验,找到了最适的兴安落叶松ISSR退火温度为56.5℃。利用所确立的体系对部分兴安落叶松种质进行扩增的结果清晰可靠,多态性好。